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elisa實(shí)驗(yàn)包被過(guò)程解析
點(diǎn)擊次數(shù):1000 更新時(shí)間:2016-07-19

包被用抗原
   
天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。合成多肽抗原是抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一個(gè)抗原決定簇,純度高,特異性也高,但由于分子量太小,往往難于直接吸附于固相上。借助于偶聯(lián)物與固相載體的吸附,間接地結(jié)合到固相載體表面。
包被用抗
IgG對(duì)聚苯乙烯有強(qiáng)吸附力,其聯(lián)結(jié)發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外。取材于抗血清或含單克隆抗體的培養(yǎng)液.須除去雜抗體后才能用于ELISA,以保證試驗(yàn)的特異性。

 

實(shí)驗(yàn)原理

 

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)表達(dá)。用純化的牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中病毒性腹瀉病毒(BVDV)

 

相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的病毒性腹瀉病毒(BVDV)

 

抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)

 

的存在與否。

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