當(dāng)前位置：質(zhì)譜兼容型蛋白磷酸酶抑制劑混合液反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
內(nèi)皮細(xì)胞分化G蛋白偶聯(lián)受體8抗體
神經(jīng)細(xì)胞鳥苷酸置換因子NGEF抗體
磷酸化真核啟動(dòng)因子2α抗體
長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶ELOVL2抗體
長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶長(zhǎng)ELOVL5抗體
有脊椎動(dòng)物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體
外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體
烯醇化酶超家族成員1抗體
核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體
內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體抗體
效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體
早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體
真核翻譯起始因子4E抗體
核輸出蛋白5抗體
腸致病性大腸桿菌抗體
E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體
睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體
聚合酶延伸因子2抗體
聚合酶延伸因子抗體
神經(jīng)生長(zhǎng)因子調(diào)控抑制蛋白抗體
內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體
紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體
微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體
內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體
雌激素受體β抗體
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